福州尿液外泌体分离稳定性好

外泌体分离方法优缺点对比：差速离心法：差速离心法仍是实验中常用的外泌体分离技术。主要步骤如下：1.使用离心机低速离心来去除细胞与细胞碎片。2.而后增加转速通过离心来消除样本中较大的细胞囊泡。3.再使用高速离心机进行高速离心，通过离心沉淀的方式提取外泌体。在这里，需要注意的是生物流体的粘度与分离的外泌体的纯度有较强的相关性。所以，对于高粘度的生物样品需要超速离心机进行较长时间的离心操作。外泌体分离方法之免疫分离法：免疫芯片方法基于表面外泌体受体，用于根据来源分离外泌体。获得的外泌体可直接分析或用于DNA或总RNA分离。外泌体胞内蛋白可用作分离外泌体的特异性标志物。此外，基于ELISA的ExoTEST也可以用于有效分离外泌体。其原理是：使用涂有外泌体抗体的ExoTEST板，可以从各种生物体液中分离出外泌体。该方法适用于常见和细胞类型特异性外泌体蛋白的检测、分析和定量。部分外泌体分离方法可能存在对外泌体结构和元素的影响。福州尿液外泌体分离稳定性好

外泌体的表征方法之微流体分析技术：微流体技术在外泌体研究方面也起着推动作用。微流体技术不只提供了高质量、高特异性的数据，并且试剂消耗量低，通量高.基于微流体技术的研究方法需要结合使用微流控芯片，微流控芯片通常由玻璃基和聚二甲基硅氧烷(PDMS)膜制成，包含许多尺寸适合所分析样品的微通道。主要区别在于芯片的内表面，可以通过多种方式对其进行功能化，例如通过涂层、多层沉积、电沉积和蚀刻.目前研究中针对不同的微流控表征方法，也制造了不同类型的微芯片，包括免疫芯片、磁性芯片和电化学芯片。外泌体及其蛋白质也可以通过比色法（标记抗体/ELISA）、直接荧光染色（DiO染料）、电化学性质变化和光学特别方法进行检测。对于结果评估，还需要额外的设备，例如读板器或荧光显微镜等。福州尿液外泌体分离稳定性好外泌体在很多生理和病理情况下都发挥着不可或缺的作用。

外泌体分离方法之基于聚合物的沉淀法：基于聚合物的沉淀技术通常包括将生物流体与含聚合物的沉淀溶液混合、4℃孵育和低速离心。用于基于聚合物的沉淀的较常见聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。这种聚合物的沉淀可以对分离的外泌体产生温和影响而且可以产生中性的pH值。由此，出现了几种常见的外泌体试剂盒：比如：SystemBiosciences,MountainView,CA,ExoQuick等。研究表明，使用ExoQuick方法可以快速执行，无需额外设备，只需用高速离心机进行超速离心可以获得高产量的外泌体。但是此方法的缺点是：非外泌体材料对外泌体分离物的污染仍然是基于聚合物的分离方法的一个问题。此外，分离物中的聚合物可能会干扰下游分析。

外泌体的提取主要包括以下几种方式：一是色谱法，这种方法分离到的外泌体在电镜下大小均一，但是需要特殊的设备，应用不普遍。二是微流控分离法，该方法通过负压及震荡等机械原理分离外泌体，产量纯度均具有较大幅度提高，但需要特定设备配合。外泌体分离方法之纳米粒径分析法：确定性横向位移依赖于颗粒流动路径的变化，而颗粒流动路径取决于颗粒尺寸。这种方法虽然比较简单，但是需要使用扫描电镜技术、动态光散射技术、纳米粒子跟踪分析技术、单粒子干涉反射成像传感器（SP-IRIS）技术等。对于外泌体大小、形态、外泌体的浓度、zeta电位等分析也可以使用粒度分析仪。的外泌体分离技术采用了磁珠分离和滤膜分离的方法。

外泌体还参与神经退行型症。在神经退行型症个体的脑脊液和外周血中已检测到几种特定于阿尔茨海默氏症、帕金森氏症和Creutzfeldt-Jakob的聚集蛋白。特别是，在从阿尔茨海默者的脑脊液样本中获得的外泌体中检测到Thr-181磷酸化的tau。在Thr-181磷酸化的Tau是阿尔茨海默的既定生物标志物。此外，α-突触核的蛋白也常在阿尔茨海默者的群体中检出。此外，在尿液中发现的外泌体标志物也可以是膀胱和前列腺疙瘩的标志物。比如：视黄酸诱导蛋白3(GPRC5A)、抵抗素、外泌体蛋白PCA-3、TMPRSS2:ERG、α1-抗胰蛋白酶、组蛋白H2B1等。除了脑和泌尿道疙瘩外，外泌体蛋白也可以是胰腺病的标志物。比如：结直肠病的外泌体蛋白标志物包括EpCAM、cadherin-17、粘蛋白13(MUC-13)、角蛋白18、claudins和ephrinB1。外泌体的转移涉及细胞因子、基质降解酶和细胞外基质重塑等多种调节步骤。福州尿液外泌体分离稳定性好

外泌体的纯化可以通过单颗粒色谱等技术实现。福州尿液外泌体分离稳定性好

分离外泌体的方法之过滤：过滤方法只取决于分子量或组分的大小，并有助于获得较佳的外泌体产量。超滤、凝胶过滤和静水透析包含在外泌体分离的过滤原理下。外泌体可以根据其定义的分子量或体积排阻限，使用标准膜过滤器从其他EV组分和细胞碎片中分离出来。市售的聚偏二乙烯碳酸酯膜过滤器具有各种孔径范围，用于渗透、纳滤和微滤应用。分离外泌体的方法之体积排阻色谱（SEC）：该方法主要有助于从分离的外泌体中去除蛋白质和脂蛋白杂质，它已被用于从尿液和血浆蛋白中分离外泌体。它被用作超速离心和超滤的后续分离方法。琼脂糖2B/CL4B、qEV和琼脂丙烯酸S-400是通常用于凝胶过滤色谱分离外泌体的色谱柱。SEC可以在低压下进行，这有助于分离具有完整完整性的外泌体。福州尿液外泌体分离稳定性好